PCR實驗室的裝修與設計
一、PCR實驗室的裝修
PCR實驗室裝修的功能區(qū)劃分,建議從3方面來考慮,即:普通實驗區(qū)、污染控制區(qū)、氣流組織。
1、普通實驗區(qū):包括產物分析區(qū)、擴增區(qū)、標本制備區(qū)、試劑準備區(qū)這4個區(qū)域。
2、污染控制區(qū):此區(qū)域的規(guī)劃有3套方案,第1套為各功能間相互連通,以套間方式進入人流/物流;第2套為設置獨立緩沖間,人流/物流分道,流程相鄰間設置物流傳遞窗;第3套為設置共用緩沖間/緩沖走廊。
3、氣流組織:PCR實驗室裝修的氣流組織需要從原始試劑混配室、DNA提取室、PCR擴增室、檢測室、送風口這5方面來考慮。
?、僭荚噭┗炫涫遥悍块g壓差為正壓,配備有潔凈工作臺,以防止其他功能間對本房間的污染。
②DNA提取室:房間壓差為負壓,配備有排風系統(tǒng),以防止提取核酸產生的氣溶膠對工作人員的傷害及擴散污染。
?、跴CR擴增室:房間壓差為負壓,與DNA提取室一樣,配備有排風系統(tǒng),以防止擴增產物造成的擴散污染。
④檢測室:房間壓差為負壓,與DNA提取室、PCR擴增室一樣,配備有排風系統(tǒng),以防止相關污染。
?、菟惋L口:采用的是頂送風,側下回/排風方式。
二、PCR實驗室的設計
這里重點介紹PCR走廊、傳遞窗這兩方面的設計。
1、PCR走廊:并不是標配,進深不夠時不要做PCR走廊,且PCR走廊會增加交叉污染。
這4個分區(qū)(試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、核算擴增區(qū)、產物分析區(qū))原本就不需連接在一起。且在物理空間上必須是完全相互獨立的,各區(qū)域無論在空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分隔狀態(tài),不能有空氣的直接相通。
2、傳遞窗:并非必須設置(只要不涉及潔/污分流就不需要設置傳遞窗),但一般實驗機構/實驗人員喜歡設置。
傳遞窗的本質——同緩沖間,是物流的緩沖間。在PCR實驗室設計中,試劑準備和標本制備間是重點保護的區(qū)域,此處*好不要加傳遞窗,防止交叉污染。實驗中的污染風險主要來自于核酸擴增時的加樣行為,但由于操作在生物安全柜(起超凈臺的作用,*新做法)內進行,且確??諝獠煌庖纾虼瞬淮嬖谖廴?。
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